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  • #146. miRNAs salivares como biomarcadores da Diabetes Mellitus tipo II
    Publication . Martins, Alexandra; Santos, Luís Silva; Rosa, Nuno; Correia, Maria
    Objetivos: Estudar o potencial de miRNAs salivares como biomarcadores em DMT2, pela revisão sistemática da evidência disponível sobre alterações de expressão de miRNAs associadas a DMT2, e identificar os miRNAs que, por terem expressão alterada em DMT2 e terem já sido detetados na saliva, são candidatos promissores a utilização como biomarcadores salivares de DMT2. Materiais e métodos: Pesquisa sistemática nas bases de dados PubMed, Web of Science e Science Direct, para identificação de estudos em que os miRNAs tenham sido quantificados em pacientes com DMT2 e construção de uma base de dados com a anotação dos resultados desses artigos. Análise estatística dos resultados globais para verificar quais os miRNAs que podem configurar biomarcadores DMT2. Verificar dos miRNAs identificados se alguns foram já identificados em fluidos orais e/ou quais os que podem ser encontrados nestes fluidos. Resultados: Foram encontrados 776 artigos não duplicados que referem miRNAs como biomarcadores para DMT2, dos quais foram selecionados 115, sendo apenas 31 incluídos nos resultados. Da análise desses artigos, verificou‐se que 53 miRNAs foram encontrados como estando alterados em amostras de pacientes diabéticos vs. amostras de pacientes com tolerância normal à glicose, e 17 estão alterados quando se comparam pacientes com tolerância normal à glicose e tolerância alterada à glicose (pré‐diabéticos). Entre estes 2 grupos de comparações, há 12 miRNAs comuns em que 3 estão aumentados em DMT2, 2 estão diminuídos e 5 estão contrarregulados. Todos estes miRNAs encontram‐se na saliva, contudo o melhor candidato a biomarcador é o hsa‐miR‐375, porque está consistentemente alterado e tem uma alteração (fold change de 1,72). Conclusões: Estudos têm demonstrado que existem perfis específicos de microRNA em paciente com DMT2, em comparação com pacientes sem DMT2. Esta informação é relevante, pois os microRNA podem ser utilizados como biomarcadores para o diagnóstico e prognóstico, bem como potenciais alvos terapêuticos da DMT2. Por fim, existem alguns estudos, em que a amostra não é a saliva, que indicam o hsa‐miR‐375 como biomarcador da DMT2. Contudo, é necessário mais estudos de validação do hsa‐miR‐375 como biomarcador salivar na DMT2.
  • SalivaTec: using xMAP® Multiplex Technology for saliva research
    Publication . Rosa, Nuno; Correia, Maria; Barros, Marlene
    SalivaTec is an European laboratory using saliva in health research (salivaTec.viseu.ucp.pt). The main goal of SalivaTec is the clarification of molecular mechanisms of disease and the validation of biomarker panels proposed by in silico studies using bioinformatics tools developed in the laboratory. We demonstrate how SalivaTec uses xMAP ® Multiplex technology to quantify different molecules in saliva. These molecules are selected by an in silico analysis of the data deposited in our databases and quantified in samples chosen through the SalivaPrint algorithm, which identifies the molecules varying the most between groups of individuals. xMAP technology allows for the detection of salivary markers with high sensitivity and reliability although some challenges remain in the application of the commercial kits to saliva.
  • Presença de genes de resistência a antibióticos na cavidade oral: uma revisão sistemática
    Publication . Sousa, Sara; Martins, Jorge; Rosa, Nuno; Barros, Marlene; Correia, Maria
    O uso excessivo e muitas vezes desnecessário de antibióticos pode originar a seleção de espécies resistentes (Moares et al., 2015). A comunidade microbiana oral por existir sob a forma de um biofilme diverso e por vezes sujeito à ação de agentes desinfetantes e antimicrobianos pode ser um local de seleção, preservação e transferência de genes de resistência a antibióticos entre os vários componentes do biofilme oral. Há estudos que destacam a propagação dos genes de resistência a antibióticos para outros locais do organismo a partir do biofilme oral (Berendonk et al. 2015). Deste modo, é de extrema importância compreender quais são os genes de resistência a antibióticos na cavidade oral, como se pode fazer a sua determinação e estimar o seu impacto na ecologia da cavidade oral. Este estudo teve como objetivos: (i) fazer o levantamento de estudos identificando resistência a antibióticos em amostras da cavidade oral; (ii) verificar que métodos foram utilizados para a deteção dos genes de resistência a antibióticos; (iii) verificar quais os genes de resistência a antibióticos encontrados.
  • Molecular highlights in peri-implantitis
    Publication . Saavedra, Mariana; Silva, António; Rosa, Nuno; Correia, Maria; Barros, Marlene
    Dental implants are one of the most frequently used treatment options for tooth replacement. Approximately 30% of patients with dental implants develop peri‐implantitis, which is an oral inflammatory disease. As established in 1993 at the First European Workshop on Periodontology, peri‐implant disease is a collective term for inflammatory processes in the implant surrounding tissues. Peri‐implant mucositis was defined as a reversible inflammatory process in the soft tissues surrounding a functioning implant, whereas peri‐implantitis is an inflammatory process additionally characterized by loss of peri‐implant bone. The diagnose of Peri‐implantitis is based on clinical, radiographic, microbiological and biological information. Several clinical studies use molecular biology assays to identify proteins in crevicular fluid that will be the initiation and progression of Peri‐implantitis disease, for the purpose of these study we used saliva sample. The aim of this study is to correlate the molecular and clinical characterization of peri‐implantar disease in order to improve our knowledge in the molecular pathophysiology of peri‐implant infections. For the development of future therapeutic strategies, it is essential to understand the molecular pathophysiology of human dental peri‐implant infections.
  • A step forward to implement saliva as diagnostic fluid
    Publication . Esteves, Eduardo; Fernandes, Mónica; Rosa, Nuno; Esteves, Ana Cristina; Correia, Maria; Barros, Marlene
  • A protein profiling strategy for periodontal disease applications: the Perio-SalivaPRINT
    Publication . Rosa, Nuno; Esteves, Eduardo; Esteves, Ana Cristina; Fernandes, Gustavo; Correia, Maria; Siqueira, Walter L.; Barros, Marlene
    Objectives: It is known that several clinical situations have characteristic molecular deregulations. Some molecular data underlying these deregulations can be found in saliva and have been annotated in databases (SalivaTecDB). Strategies are needed to identify the phenotypes characteristic of these deregulations. Our group has developed a strategy that allows the establishment of saliva protein profiles reflecting different conditions (health and disease). These profiles can be integrated to clinical data (SalivaPRINT Toolkit). The present work aims to identify the Periodontal Diseases (PD)-specific protein profiles. Methods: Unstimulated whole saliva was collected from a group of healthy subjects and a group of PD patients (with gingivitis, periodontitis or periimplantitis). Salivary proteins were separated by the Experion™ automated capillary electrophoresis. The protein profiles of each condition were integrated with the corresponding protein data retrieved from our in-house database (SalivaTecDB). Results: The strategy used enabled the determination of a total protein profile from saliva characteristic of each PDs -the Perio-SalivaPrint. The use of the SalivaPrint Toolkit allowed the identification of molecular weight ranges altered in PD. Using SalivaTecDB we were able to suggest proteins potentially involved in the underlying dysregulated mechanisms of the disease. Conclusions: This approach enabled the determination of a Perio-SalivaPrint – protein profiles specific for gingivitis, periodontitis or periimplantitis - that could empower the use of saliva as a simple and less expensive diagnostic and monitoring fluid. The strategy presented could be an important tool for future applications in the early diagnostic/ screening of Periodontal Disease patients with applications in chairside monitoring.