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Characterisation of protein-rich poultry by-products after hydrothermal process and enzymatic hydrolysis

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The processing of farm poultry leads to a significant production of chicken feathers, which are currently categorized as waste due to the lack of adequate recycling methods. To address this issue, a potential solution involving a series of procedures was explored, resulting in samples holding promise in positively affecting plant growth and soil composition. This thesis focused on investigating the presence and concentration of D-form amino acids in these resulting samples, as they can inhibit plant growth. Various procedures were developed to shed light on the D-form composition of the samples, including the use of Chiralpak ZWIX (-) column in conjunction with LC-QTOF-MS equipment to separate and detect D- and L-form amino acids. Additionally, an effective separation technique for D- and L-form amino acids was established using a 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate (AQC) derivatization reagent to address challenges posed by overlapping peaks or inadequate separation of DL-amino acids. Furthermore, a robust purification method was developed to extract free amino acids from the samples using the solid phase extraction (SPE) procedure. Finally, both qualitative and quantitative techniques were employed to assess the presence and concentration of D-form amino acids in the samples. The findings validated the presence of D-form amino acids, including Gln, Pro, Phe, Met, Glu and Ser, in the resulting samples. Among these, D-Ser and D-Glu exhibited the highest concentrations, while D-Met showed the lowest concentration across all the samples.
Da indústria de frango surge uma quantidade significativa de penas, as quais atualmente são tratadas como resíduos devido à ausência de métodos adequados de reciclagem. De forma a enfrentar este problema, foi explorada uma solução envolvendo uma série de processos. A solução resultante tem potencial de ser usada de forma a impactar positivamente o crescimento das plantas e a composição dos solos. Esta tese concentrou-se na investigação da presença e concentração de D-aminoácidos na solução resultante, uma vez que estes têm efeitos inibitórios sobre o crescimento das plantas. Foram desenvolvidos vários procedimentos de forma a detetar a composição de D-aminoácidos na solução, incluindo a utilização de uma coluna Chiralpak ZWIX (-) em conjunto com LC-QTOF-MS para separar e detetar DL-aminoácidos. Seguidamente, foi utilizado um reagente de derivatização, o carbamato de 6-aminoquinolil-N-hidroxisuccinimida, para separar os DL-aminoácidos que continham picos sobrepostos ou apresentavam separação inadequada. Além disso, foi desenvolvido um processo de purificação para isolar os aminoácidos livres em solução, utilizando a extração em fase sólida. Finalmente, foram empregues métodos qualitativos e quantitativos para determinar a presença e concentração de D-aminoácidos em solução. Os resultados confirmaram a presença de D-aminoácidos incluindo Gln, Pro, Phe, Met, Glu e Ser na solução resultante. Entre os D-aminoácidos encontrados, D-Ser e D-Glu apresentaram as maiores concentrações, enquanto D-Met apontou a menor concentração em solução.

Descrição

Palavras-chave

D-form amino acids Chiralpak ZWIX (-) column LC-QTOF-MS 6-aminoquinolyl-N- hydroxysuccinimidyl carbamate Solid phase extraction D-aminoácidos Coluna chiralpak ZWIX (-) Carbamato de 6-aminoquinolil-N-hidroxisuccinimida Extração em fase sólida

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