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Bacterial vaginosis is the leading vaginal disorder, having an important impact worldwide. It is estimated to affect 30-50% of African-American women and 10-20% of Caucasian women at reproductive age. During bacterial vaginosis, a decrease of Lactobacillus spp. and an increase in the number of anaerobic microorganisms, such as Gardnerella vaginalis and Atopobium vaginae in the vaginal epithelium is observed. Although commonly associated to bacterial vaginosis, G. vaginalis has also been associated to the vagina of healthy women, but in lower numbers. The growth of G. vaginalis can be identified by beta hemolysis, variable Gram staining, negative oxidase and catalase (conventional microbiological tests) and by molecular techniques.
The main goal of this study was the identification of G. vaginalis and A. vaginae in the vaginal microflora of healthy or ill women, by molecular techniques. The reason of our interest in these microorganisms was based on fact of being the mostly isolated microorganisms in cases of bacterial vaginosis. Gardnerella vaginalis and, most recently, A. vaginae were two microorganisms firstly associated to bacterial vaginosis, however more recent studies identified them on the healthy vaginal microflora. In Portugal, the unique study involving bacterial vaginosis was done in 1998, which consequently straighten up the importance of this study. By this way, our study involved the reception of swabs obtained by self-harvest, gynecological private practice or even in hospitals emergency and the posterior manipulation of the samples. The identification of G. vaginalis and A. vaginae was specially based on the analysis of the clinical samples by Polymerase Chain Reaction (PCR), and by Peptide Nucleic Acid Fluorescence in situ Hybridization (PNA-FISH).
The results revealed that from fifty-seven Portuguese women samples involved in this study, the presence of G. vaginalis was detected in sixteen samples, which corresponds to a prevalence of 28 %. On the other hand A. vaginae was present in five clinical samples, which corresponds to 8 % of the samples.
The molecular techniques allowed the direct identification of part of the microorganisms present on the vaginal swabs and allowed to conclude that the G. vaginalis and A. vaginae are not only associated to bacterial vaginosis but they can also be founded, in different percentage, in a range of Portuguese healthy women.
A vaginose bacteriana corresponde ao distúrbio mais comum nas mulheres, tendo um impacto importante em todo o Mundo. Estima-se que afecta cerca de 30-50% das mulheres Afro-Americanas e 10-20% das mulheres Caucasianas em idade reprodutiva. Associado ao aparecimento de vaginose bacteriana, verifica-se um decréscimo do número de Lactobacillus spp. no epitélio com consequente aumento do número de microrganismos anaeróbios, tais como Gardnerella vaginalis e Atopobium vaginae. Embora comumente associada à vaginose bacteriana, G. vaginalis foi também identificada no epitélio vaginal de mulheres saudáveis, mas em menores números.O crescimento de G. vaginalis pode ser identificado por beta hemólise, Gram-variável, oxidase e catalase negativa (testes microbiológicos convencionais) e ainda através de técnicas moleculares. O principal objectivo deste projecto foi a identificação de A. vaginae e G. vaginalis na microflora vaginal de mulheres Portuguesas, saudáveis ou já diagnosticadas, à priori, como portadoras de vaginose bacteriana; através de métodos moleculares. O principal interesse no estudo destes microrganismos deveu-se ao facto de serem, nos últimos anos, os mais usualmente isolados de casos de vaginose bacteriana. Gardnerella vaginalis e, mais recentemente, A. vaginae são dois microrganismos inicialmente associados a vaginose mas actualmente identificados em mulheres saudáveis. Em Portugal, o primeiro e único estudo associado a vaginose remonta de 1998, o que justifica a importância dos dados obtidos neste estudo. Neste sentido, o estudo envolveu a recepção de amostras clínicas obtidas por auto-colheita de mulheres saudáveis, em consultório de ginecologia ou mesmo nas emergências do Hospital de Braga, e posterior tratamento das amostras. A caracterização foi levada a cabo por métodos moleculares como Reacção em Cadeia da Polimerase (PCR) e Microscopia Fluorescente com Hibridação in situ (FISH). Os resultados demonstraram, através de métodos moleculares, que das cinquenta e sete amostras recolhidas de mulheres Portuguesas e associadas a este projecto, G. vaginalis foi identificada em dezasseis amostras, o que corresponde a 28% do número total de amostras. Atopobium vaginae foi apenas encontrado em cinco casos o que corresponde a 8% das mesmas. Em suma, as técnicas moleculares permitiram a identificação directa de parte dos microrganismos presentes nas zaragatoas, sendo assim possível concluir que G. vaginalis and A. vaginae não estão unicamente associadas a vaginose bacteriana mas também estão presentes, em diferentes proporções, em mulheres Portuguesas saudáveis.
A vaginose bacteriana corresponde ao distúrbio mais comum nas mulheres, tendo um impacto importante em todo o Mundo. Estima-se que afecta cerca de 30-50% das mulheres Afro-Americanas e 10-20% das mulheres Caucasianas em idade reprodutiva. Associado ao aparecimento de vaginose bacteriana, verifica-se um decréscimo do número de Lactobacillus spp. no epitélio com consequente aumento do número de microrganismos anaeróbios, tais como Gardnerella vaginalis e Atopobium vaginae. Embora comumente associada à vaginose bacteriana, G. vaginalis foi também identificada no epitélio vaginal de mulheres saudáveis, mas em menores números.O crescimento de G. vaginalis pode ser identificado por beta hemólise, Gram-variável, oxidase e catalase negativa (testes microbiológicos convencionais) e ainda através de técnicas moleculares. O principal objectivo deste projecto foi a identificação de A. vaginae e G. vaginalis na microflora vaginal de mulheres Portuguesas, saudáveis ou já diagnosticadas, à priori, como portadoras de vaginose bacteriana; através de métodos moleculares. O principal interesse no estudo destes microrganismos deveu-se ao facto de serem, nos últimos anos, os mais usualmente isolados de casos de vaginose bacteriana. Gardnerella vaginalis e, mais recentemente, A. vaginae são dois microrganismos inicialmente associados a vaginose mas actualmente identificados em mulheres saudáveis. Em Portugal, o primeiro e único estudo associado a vaginose remonta de 1998, o que justifica a importância dos dados obtidos neste estudo. Neste sentido, o estudo envolveu a recepção de amostras clínicas obtidas por auto-colheita de mulheres saudáveis, em consultório de ginecologia ou mesmo nas emergências do Hospital de Braga, e posterior tratamento das amostras. A caracterização foi levada a cabo por métodos moleculares como Reacção em Cadeia da Polimerase (PCR) e Microscopia Fluorescente com Hibridação in situ (FISH). Os resultados demonstraram, através de métodos moleculares, que das cinquenta e sete amostras recolhidas de mulheres Portuguesas e associadas a este projecto, G. vaginalis foi identificada em dezasseis amostras, o que corresponde a 28% do número total de amostras. Atopobium vaginae foi apenas encontrado em cinco casos o que corresponde a 8% das mesmas. Em suma, as técnicas moleculares permitiram a identificação directa de parte dos microrganismos presentes nas zaragatoas, sendo assim possível concluir que G. vaginalis and A. vaginae não estão unicamente associadas a vaginose bacteriana mas também estão presentes, em diferentes proporções, em mulheres Portuguesas saudáveis.
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Keywords
Vaginose bacteriana Amostras clínicas Gardnerella vaginalis Atopobium vaginae Lactobacillus spp Métodos moleculares Interacção Cultura Bacterial vaginosis Clinical samples Molecular Methods Interaction Culture