| Name: | Description: | Size: | Format: | |
|---|---|---|---|---|
| 3.65 MB | Adobe PDF |
Authors
Advisor(s)
Abstract(s)
The Extracellular Matrix (ECM) is a complex structure composed of proteins and polysaccharides that assemble into an organized network, which besides giving physical support to the cell, influences it main biological processes, such as cell survival, shape,polarity and behavior. This dynamic role is due to the presence of cryptic sites locatedin ECM proteins. A cryptic fragment of laminin-111 released by matrixmetallo proteinase 2 (MMP2) proteolytic activity was identified in Molly Stevens’ groupat Imperial College London. MMP2 cleaves the β1-chain of laminin-111, leading to the release of the β1–LN–LE1-4 fragment. Once released, it binds to α3-integrin in the cell membrane and modulates the epithelial-to-mesenchymal transition (EMT), an important process in development, tissue fibrosis and cancer metastasis. In tissue fibrosis, excess of scar tissue can be accumulated leading to inhibition of normal tissue functions. Since EMT is a crucial process in fibrosis, researchers proposed preventing epithelial cells to adopt mesenchymal features as a potential treatment strategy. In this work, the effect of this cryptic laminin fragment was evaluated in mus musculus mammary gland epithelial cells (NMuMGs) undergoing transforming growth factor β (TGFβ)-induced EMT using imaging and biochemical techniques. In this project, it is shown that the laminin β1-fragment down-regulates EMT-related markers in NMuMG cells, providing a potential reduction of fibrosis pathology. In future work, the relationship between different cellular pathways will have to be shown and possible application strategies to be developed. This project explores the tremendous potential of the information hidden within cryptic ECM sites.
A matriz extracelular é uma estrutura complexa composta por proteínas epolissacarídeos que se unem numa rede organizada, que para além de dar suporte físico à célula, influencia os seus processos biológicos, como sobrevivência, forma, polaridade e comportamento celular. A matriz consegue desempenhar este papel dinâmico devido alocais crípticos escondidos nas proteínas da mesma. Um fragmento da laminina-111 é libertado pela atividade proteolítica da enzima metaloproteínase 2 (MMP2), o qual foi identificado pelo grupo da Molly Stevens na Imperial College London. A MMP2 quebra a laminina-111 na sua cadeia β1, levando a libertação do fragmento β1–LN–LE1-4. Quando libertado, este fragmento liga-se à integrina alfa3 na membrana celular e consegue modular a transição epitélio-mesenquimal (EMT), um processo importante no desenvolvimento dos órgãos humanos, fibrose dos tecidos e metástases cancerígenas. Na fibrose, excesso de tecido cicatrizado é acumulado e leva à inibição das funções normais do tecido. Tendo em conta que o EMT é um processo crucial na fibrose, vários investigadores supuseram que evitando a transformação de células epiteliais em mesenquimais, poderia ser uma potencial estratégia para curar a doença. Neste trabalho, o efeito deste fragmento de laminina foi analisado quando o EMT foi induzido em células epiteliais da glândula mamária de ratos (NMuMGs) através do fator de crescimento β (TGFβ), usando técnicas de imagem e bioquímicas para análise dos resultados. Concluindo, neste projeto foi demonstrado que o fragmento β1 de laminina111 diminui a expressão de marcadores específicos do EMT em células NMuMG, demonstrado uma possibilidade em ser usado para a redução da doença de fibrose. Futuramente, a relação entre diferentes caminhos celulares terá de ser demonstrada e possíveis aplicações desenvolvidas. Este projeto explora o potencial tremendo da informação escondida nos locais crípticos da ECM.
A matriz extracelular é uma estrutura complexa composta por proteínas epolissacarídeos que se unem numa rede organizada, que para além de dar suporte físico à célula, influencia os seus processos biológicos, como sobrevivência, forma, polaridade e comportamento celular. A matriz consegue desempenhar este papel dinâmico devido alocais crípticos escondidos nas proteínas da mesma. Um fragmento da laminina-111 é libertado pela atividade proteolítica da enzima metaloproteínase 2 (MMP2), o qual foi identificado pelo grupo da Molly Stevens na Imperial College London. A MMP2 quebra a laminina-111 na sua cadeia β1, levando a libertação do fragmento β1–LN–LE1-4. Quando libertado, este fragmento liga-se à integrina alfa3 na membrana celular e consegue modular a transição epitélio-mesenquimal (EMT), um processo importante no desenvolvimento dos órgãos humanos, fibrose dos tecidos e metástases cancerígenas. Na fibrose, excesso de tecido cicatrizado é acumulado e leva à inibição das funções normais do tecido. Tendo em conta que o EMT é um processo crucial na fibrose, vários investigadores supuseram que evitando a transformação de células epiteliais em mesenquimais, poderia ser uma potencial estratégia para curar a doença. Neste trabalho, o efeito deste fragmento de laminina foi analisado quando o EMT foi induzido em células epiteliais da glândula mamária de ratos (NMuMGs) através do fator de crescimento β (TGFβ), usando técnicas de imagem e bioquímicas para análise dos resultados. Concluindo, neste projeto foi demonstrado que o fragmento β1 de laminina111 diminui a expressão de marcadores específicos do EMT em células NMuMG, demonstrado uma possibilidade em ser usado para a redução da doença de fibrose. Futuramente, a relação entre diferentes caminhos celulares terá de ser demonstrada e possíveis aplicações desenvolvidas. Este projeto explora o potencial tremendo da informação escondida nos locais crípticos da ECM.
Description
Keywords
Tissue fibrosis Cryptic basement membrane Epithelial-to-Mesenchymal transition Laminin-111 ß1-fragment and NMUMG cells Fibrose tecidual Membrana basal críptica Transição epitélio-mesenquimal Laminina-111 ß1-fragmento e células NMUMG