Browsing by Author "Ferreira, Liliana Chaves Cerejo"
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- Estudo fenotípico da maturação da linha eritróide na medula ósseaPublication . Ferreira, Liliana Chaves Cerejo; Lima, Margarida; Queiroz, Maria LuísA eritropoiese é um processo complexo de diferenciação de progenitores eritróides em glóbulos vermelhos que se dá, na medula óssea dos humanos, durante a infância e a vida adulta. Este processo, regulado por diversos factores, permite a diferenciação de progenitores eritróides, não identificáveis morfologicamente, em precursores eritróides (proeritroblastos, eritroblastos basófilos, eritroblastos policromáticos, eritroblastos ortocromáticos), estes em reticulócitos e, por fim, em glóbulos vermelhos, células pequenas, anucleadas e bicôncavas, altamente especializadas no transporte de oxigénio. Nos laboratórios clínicos, o estudo da diferenciação da linha eritróide é tradicionalmente efectuado através da análise da morfologia, e contagem diferencial das células nos diferentes estadios de diferenciação reconhecíveis pelas suas características morfológicas. Neste estudo avaliamos a maturação da linha eritróide por citometria de fluxo, através da marcação de amostras de medula óssea com uma combinação de oito anticorpos monoclonais conjugados com fluorocromos (anti-CD36 FITC, anti-CD105 PE, anti-CD34 PerCP-Cy5.5, anti-CD117 PE-Cy7, anti-CD33 APC, anti-CD71 APC-H7 / APC-Alexa Fluor 750, anti-HLA-DR PB e anti-CD45 PO) e comparamos os resultados com os obtidos no estudo morfológico. O estudo por citometria de fluxo permitiu identificar quatro estadios de maturação com perfil fenotípico distinto. No estadio 1, mais imaturo, as células expressam todos os antigénios analisados, no estadio 2 perdem a expressão de CD45, CD34, HLA-DR e CD33, no estadio 3 perdem a expressão de CD117 e no estadio 4, mais maduro, a expressão de CD105. A expressão de CD71 e de CD36 mantém-se ao longo de todo o processo maturativo, atingindo o máximo nos estadios 3 e 4, respectivamente. Os estadios fenotípicos 1, 2, 3 e 4 parecem corresponder, grosso modo, aos estadios morfológicos de proeritroblasto (podendo incluir préproeritroblastos), eritroblasto basófilo, eritroblasto policromático e eritroblasto ortocromático, respectivamente. Em resumo, utilizando um painel de imunofenotipagem com 8 cores, caracterizamos a maturação da linha eritróide na medula óssea por citometria, identificamos diferentes estadios maturativos com base no perfil fenotípico e estabelecemos a sua correlação com os estadios identificáveis por critérios morfológicos.