Costa, Ângela Margarida AmorimMarques, Maria Benedita Almeida Garrett de Sampaio MaiaMagalhães, Maria Inês Martins Santos de2023-04-112024-04-112023-02-142022-12http://hdl.handle.net/10400.14/40787Early-life gut microbiota is highly modifiable, and subject to modulation by external factors such as maternal microbiota, mode of delivery, and feeding strategies. And important “window of opportunity” is established in the first 1000 days of life, in which the infant’s gut microbiota influences the development and maturation of the immune system. Thus, any disturbances to the gut microbiota during this period of development will have consequences for the child’s future health. The mother represents one of the main sources of microorganisms for the infant, and through the mechanism of vertical transmission of microbiota, it may transmit a dysregulated gut microbiota in cases of maternal intestinal dysbiosis. Considering the important role of the mother in establishing the infant’s gut microbiota, this study aimed to determine the impact of maternal obesity on the immunomodulatory ability of the infant’s gut microbiota. To achieve our aim, it was necessary to optimize the experimental protocols, namely, i) the separation of gut microbiota from infant stool samples and inactivation with UV radiation, and ii) the stimulation of monocyte-derived dendritic cells and T-cells with the extracted microbiota. Following protocol optimization, a set of fecal samples from infants of healthy (n=3) and obese mothers (n=3), collected over the first year of life (1, 6, and 12 months), were assessed. The preliminary results obtained through the stimulation of immune cells with a limited sample number of gut microbiota from infants of obese and lean mothers revealed that, although it led to immune cell activation, there were no significant differences between children from obese or lean mothers observed regarding to expression levels of activation markers of immune cells. In conclusion, this work allowed the optimization of an experimental protocol for evaluating the impact of maternal obesity on the immunomodulatory ability of the infant’s gut microbiota. Presenting only preliminary results it would be premature to assume that maternal obesity does not seem to influence the modulation of the immune system in early life, as it will be necessary to carry out more experiments with a larger number of samples to draw robust conclusions.A microbiota intestinal na infância é altamente modificável, estando sujeita à modulação por fatores externos, como a microbiota materna, o tipo de parto e a estratégia de alimentação. Nos primeiros 1000 dias de vida estabelece-se uma importante “janela de oportunidade”, em que a microbiota intestinal do bebé influencia o desenvolvimento e maturação do sistema imune. Desta forma, qualquer perturbação à microbiota intestinal durante este período de desenvolvimento terá consequências na saúde futura da criança. A mãe representa uma das principais fontes de microrganismos para o bebé, sendo que, através do mecanismo de transmissão vertical de microbiota, poderá transmitir uma microbiota desregulada em casos de disbiose intestinal materna. Considerando o importante papel da mãe no estabelecimento da microbiota intestinal da criança, o objetivo deste trabalho consistiu na determinação do impacto da obesidade materna na capacidade imunomoduladora da microbiota intestinal infantil. Para responder ao objetivo proposto foi necessário a otimização de protocolos experimentais, nomeadamente, i) a separação de microbiota intestinal de amostras fecais infantis e inativação com radiação UV, e ii) a estimulação de células dendríticas e células T com a microbiota previamente extraída. Após otimização dos protocolos, avaliou-se um conjunto de fezes provenientes de crianças nascidas de mães saudáveis (n=3) e obesas (n=3), recolhidas ao longo do primeiro ano de vida (1, 6 e 12 meses de vida). Os resultados preliminares obtidos através da estimulação de células imunes com um número limitado de amostras de microbiota intestinal de bebés de mães obesas e saudáveis revelou que, apesar da microbiota intestinal ter levado à ativação das células imunes, não se observaram diferenças significativas entre as crianças de mães obesas ou de mães saudáveis relativamente à expressão de marcadores de ativação de células imunes. Em conclusão, este trabalho permitiu a otimização do protocolo experimental para avaliação da capacidade imunomoduladora da microbiota intestinal infantil. Apenas com os resultados preliminares será precoce assumir que a obesidade materna não parece influenciar a modulação do sistema imunitário no início de vida, pois será necessário realizar mais experiências com um número maior de amostras para tirar conclusões robustas.engGut microbiotaInfancyObesityDysbiosisImmunityMicrobiota IntestinalInfânciaObesidadeDisbioseImunidademaster thesis203254961